1. Định lượng Enterobacteriaceae bằng phương pháp đếm khuẩn lạc

Định lượng Enterobacteriaceae bằng phương pháp đếm khuẩn lạc là một trong những phương pháp phổ biến để đánh giá sự hiện diện và số lượng vi sinh vật trong thực phẩm, nước uống, và các mẫu môi trường khác. Dưới đây là các bước cơ bản để thực hiện phương pháp này:

Bước 1: Chuẩn bị mẫu thử

- Mẫu ban đầu: Mẫu thực phẩm, nước uống hoặc môi trường cần được chuẩn bị và pha loãng (nếu cần) để có thể xác định chính xác số lượng vi khuẩn.

- Pha loãng mẫu: Sử dụng kỹ thuật pha loãng thập phân (ví dụ: 1:10, 1:100, 1:1000,...) để giảm mật độ vi khuẩn trong mẫu. Điều này giúp đảm bảo rằng số khuẩn lạc đếm được trên đĩa nằm trong giới hạn thích hợp (khoảng 30 - 300 khuẩn lạc/đĩa).

Bước 2: Chuẩn bị môi trường nuôi cấy

- Chọn môi trường phù hợp: Môi trường nuôi cấy đặc hiệu cho Enterobacteriaceae như môi trường VRBG (Violet Red Bile Glucose Agar) thường được sử dụng. Môi trường này giúp ức chế các loại vi khuẩn không phải là Enterobacteriaceae và tạo điều kiện thuận lợi cho sự phát triển của chúng.

- Đổ đĩa Petri: Sau khi chuẩn bị môi trường, đổ vào đĩa Petri đã tiệt trùng và để nguội cho đến khi đông đặc.

Bước 3: Cấy mẫu

- Cấy mẫu: Lấy một thể tích xác định (thường là 1 ml) từ mẫu đã pha loãng và cho vào đĩa Petri chứa môi trường nuôi cấy.

- Phủ môi trường: Sau khi cấy mẫu, phủ thêm một lớp môi trường VRBG hoặc tương tự lên trên để đảm bảo vi khuẩn có thể phát triển trong môi trường thích hợp.

Bước 4: Ủ đĩa

Đặt các đĩa Petri đã gieo mẫu vào tủ ủ ở nhiệt độ thích hợp (thường là 37°C) trong khoảng thời gian từ 18-24 giờ.

Bước 5: Đếm khuẩn lạc

Sau khi ủ, đếm số lượng khuẩn lạc có trên đĩa. Khuẩn lạc của Enterobacteriaceae thường có màu đỏ hoặc hồng do môi trường có các chỉ thị màu. Đĩa có từ 30 đến 300 khuẩn lạc là đĩa được chọn để đếm chính xác.

Bước 6: Tính toán số lượng vi khuẩn

Sử dụng công thức sau để tính toán:

Trong đó:

-Số khuẩn lạc đếm được: Tổng số khuẩn lạc trên đĩa Petri.

- Độ pha loãng: Hệ số pha loãng của mẫu.

- Thể tích cấy mẫu: Lượng mẫu được gieo (thường là 1 ml).

* Lưu ý:

- Đảm bảo các dụng cụ được tiệt trùng cẩn thận để tránh nhiễm bẩn mẫu.

- Kết quả cuối cùng thường được biểu diễn dưới dạng CFU/ml hoặc CFU/g (colony forming units per ml hoặc per gram), tùy thuộc vào mẫu thử.

- Phương pháp đếm khuẩn lạc là cách trực tiếp và chính xác để định lượng Enterobacteriaceae trong nhiều loại mẫu.

2. Phương pháp sử dụng đĩa Compact Dry đổ sẵn môi trường

- Compact Dry là một phương pháp định lượng vi sinh nhanh chóng và tiện lợi, được sử dụng rộng rãi trong kiểm nghiệm thực phẩm. Với đĩa Compact Dry dành riêng cho Enterobacteriaceae (Compact Dry ETB), quá trình định lượng các vi khuẩn thuộc nhóm này trở nên đơn giản và tiết kiệm thời gian so với các phương pháp truyền thống. Tham khảo chi tiết sản phẩm tại đây.

- Dưới đây là các bước chi tiết để định lượng Enterobacteriaceae bằng đĩa Compact Dry ETB:

1. Chuẩn bị mẫu thử

- Mẫu thực phẩm: Lấy một lượng mẫu thực phẩm phù hợp để phân tích. Mẫu có thể cần phải pha loãng tùy theo loại và dạng mẫu (rắn, lỏng).

- Pha loãng mẫu: Nếu cần, mẫu thực phẩm được pha loãng bằng dung dịch đệm pha loãng như nước muối sinh lý (0,85% NaCl) hoặc dung dịch peptone. Thông thường, mẫu được pha loãng ở các bậc thập phân như 1:10, 1:100, hoặc 1:1000, tùy thuộc vào mật độ vi khuẩn dự kiến.

2. Cấy mẫu lên đĩa Compact Dry ETB Enterobacteriaceae

- Đĩa Compact Dry ETB: Đây là đĩa đã có sẵn môi trường khô và được thiết kế để kiểm tra Enterobacteriaceae. Môi trường này bao gồm các chất dinh dưỡng cần thiết và thuốc chỉ thị màu.

* Cách sử dụng

- Mở nắp đĩa Compact Dry.

- Lấy 1 ml mẫu đã pha loãng và nhỏ trực tiếp vào giữa đĩa.

- Mẫu sẽ tự động lan tỏa và hấp thụ vào môi trường khô trên đĩa Compact Dry.

3. Ủ mẫu

- Nhiệt độ ủ: Sau khi mẫu đã được gieo lên đĩa, đậy nắp lại và ủ ở nhiệt độ thích hợp, thường là 35°C.

- Thời gian ủ: Thời gian ủ từ 24 giờ.

4. Đọc kết quả

- Sau khi ủ, các vi khuẩn Enterobacteriaceae sẽ phát triển thành các khuẩn lạc có màu đỏ hoặc hồng, nhờ vào cơ chế phản ứng với thuốc chỉ thị màu trong đĩa Compact Dry ETB Enterobacteriaceae.

- Đếm khuẩn lạc: Đếm số lượng khuẩn lạc có màu đỏ hoặc hồng trên đĩa Compact Dry bằng mắt thường hoặc sử dụng thiết bị đếm tự động nếu có.

- Số lượng vi khuẩn: Số khuẩn lạc đếm được sẽ phản ánh số lượng vi khuẩn Enterobacteriaceae trong 1 ml mẫu thử ban đầu hoặc được tính toán lại nếu mẫu đã được pha loãng.

5. Tính toán số lượng vi khuẩn

- Nếu mẫu đã được pha loãng, số lượng vi khuẩn Enterobacteriaceae sẽ được tính toán bằng công thức:

- Trong đó:

- Số khuẩn lạc đếm được: Số khuẩn lạc đỏ/hồng trên đĩa Compact Dry.

- Thể tích cấy mẫu: Lượng mẫu đã sử dụng (thường là 1 ml).

- Độ pha loãng: Hệ số pha loãng của mẫu, nếu đã được pha loãng.

* Ưu điểm của phương pháp Compact Dry

- Nhanh chóng và dễ thực hiện: Không cần chuẩn bị môi trường nuôi cấy riêng biệt, môi trường khô sẵn có trên đĩa Compact Dry rất tiện lợi.

- Tiết kiệm thời gian và không gian: Việc ủ mẫu trên đĩa Compact Dry chiếm ít diện tích hơn so với các đĩa Petri truyền thống.

- Độ chính xác cao: Môi trường được thiết kế đặc biệt để phát hiện và định lượng chính xác Enterobacteriaceae.

- Kết quả rõ ràng: Các khuẩn lạc có màu sắc đặc trưng (đỏ/hồng), giúp dễ dàng phân biệt và đếm.

* Lưu ý khi sử dụng Compact Dry ETB

- Cần thực hiện đúng kỹ thuật vô trùng trong quá trình lấy mẫu và cấy mẫu để tránh nhiễm chéo.

- Đảm bảo việc bảo quản đĩa Compact Dry đúng cách theo hướng dẫn của nhà sản xuất để đảm bảo chất lượng môi trường không bị ảnh hưởng.

- Phương pháp đĩa môi trường đổ sẵn thạch Compact Dry ETB Enterobacteriaceae là một lựa chọn tuyệt vời cho các phòng thí nghiệm thực phẩm vì tính tiện lợi và độ chính xác của nó trong việc kiểm nghiệm Enterobacteriaceae.

Việc lựa chọn phương pháp phù hợp không chỉ giúp phát hiện nhanh chóng và chính xác sự hiện diện của Enterobacteriaceae, mà còn đóng vai trò quan trọng trong việc bảo vệ sức khỏe cộng đồng và nâng cao chất lượng sản phẩm. Trên đây là các phương pháp định lượng Enterobacteriaceae bằng phương pháp đếm khuẩn lạc, quý khách hàng vui lòng liên hệ với chúng tôi để được tư vấn giải pháp phù hợp với nhu cầu sử dụng!