- Ưu điểm lớn nhất của dòng cột IAC này là độ thu hồi cao, độ tinh sạch vượt trội và tính lặp lại ổn định khi sử dụng đúng quy trình.

- Để giúp các đơn vị kiểm nghiệm đạt kết quả tốt nhất, dưới đây là quy trình chuẩn, lưu ý quan trọng và các lỗi thường gặp khi sử dụng cột IAC R-Biopharm.

1. Tại sao phải sử dụng cột ái lực miễn dịch khi kiểm nghiệm Mycotoxin?

- Loại bỏ tạp chất hiệu quả, tối ưu cho HPLC, LC-MS/MS

- Độ tinh sạch dung dịch cao giúp tăng độ nhạy và giảm nhiễu nền

- Kiểm soát sai số, đảm bảo phù hợp các tiêu chuẩn AOAC, ISO, EU

- Tiết kiệm thời gian xử lý mẫu, giảm chi phí lặp mẫu

R-Biopharm cung cấp nhiều loại cột ái lực miễn dịch, được tối ưu hóa cho từng loại mycotoxin và ứng dụng cụ thể. Một số dòng sản phẩm nổi bật bao gồm:

- Cột ái lực miễn dịch phân tích Aflatoxin | AFLARHONE® WIDE

- Cột ái lực miễn dịch phân tích Ochratoxin | OCHRARHONE® WIDE

- Cột ái lực miễn dịch phân tích Zearalenone | ZONRHONE® WIDE

- Cột ái lực miễn dịch phân tích DON | DONRHONE® WIDE

- Cột ái lực miễn dịch phân tích Fumonisin | FUMONIPREP®

- Cột ái lực miễn dịch phân tích Aflatoxin M1 | AFLAPREP® M WIDE

2. Quy trình chuẩn sử dụng cột IAC R-Biopharm (để đạt độ thu hồi tối ưu)

Bước 1: Chuẩn bị và tiền xử lý mẫu

Tùy loại độc tố, quy trình chuẩn của R-Biopharm bao gồm:

a. Chiết mẫu

- Cân chính xác lượng mẫu theo khuyến cáo (5–25 g tùy độc tố).

- Thêm dung môi chiết: Methanol–water (70:30) hoặc Acetonitrile–water, tùy từng bộ kit/cột IAC.

- Lắc mạnh hoặc đồng hóa trong 2–5 phút.

b. Lọc / Ly tâm

- Lọc qua giấy lọc hoặc ly tâm để loại bỏ cặn.

- Đối với mẫu béo (đậu phộng, ngô, cám gạo), nên lọc lần 2 để tăng độ trong.

c. Pha loãng dịch chiết

- Đây là bước cực kỳ quan trọng để tránh phá hủy liên kết kháng thể trong cột IAC.

- Pha loãng theo đúng tỷ lệ hướng dẫn (ví dụ: 1:4 hoặc 1:7 tùy từng loại cột).

- Kiểm tra pH dung dịch phải từ 6,0–8,0.

Bước 2: Nạp mẫu qua cột IAC

- Gắn cột lên giá và mở nắp dưới cho phép dịch chảy tự nhiên.

- Dùng pipet nạp 1 mL/10–20 giây, không nạp quá nhanh.

- Không dùng áp lực, không bóp cột, không hút chân không quá mạnh.

- Đảm bảo toàn bộ dịch nạp đi qua gel kháng thể.

Bước 3: Rửa cột

- Rửa với nước/đệm theo đúng thể tích hướng dẫn (thường 10 mL).

- Mục tiêu: loại bỏ hoàn toàn tạp chất, đảm bảo nền sạch khi đưa vào HPLC/LC-MS/MS.

Bước 4: Elute (giải hấp) mycotoxin

- Dùng methanol tinh khiết hoặc đệm elution (tùy loại cột).

- Thể tích thường 1–2 mL.

- Thu dịch elute vào vial sạch, có thể định mức hoặc bốc hơi – hòa tan lại nếu cần (HPLC/LC-MS/MS).

3. Những lỗi thường gặp khi sử dụng cột IAC & cách khắc phục

❌ Lỗi 1: Nạp mẫu quá nhanh → Thu hồi giảm

- Nguyên nhân: dịch không kịp tiếp xúc kháng thể, giảm khả năng bắt độc tố.

- Khắc phục: duy trì tốc độ chảy 1 mL/10–20 giây (chảy nhỏ giọt).

❌ Lỗi 2: pH dịch chiết không chuẩn → Kháng thể bị ức chế

- pH < 6 hoặc > 8 đều làm giảm hiệu suất liên kết.

- Giải pháp: điều chỉnh pH bằng NaOH hoặc HCl loãng trước khi nạp cột.

❌ Lỗi 3: Dịch chiết còn quá nhiều methanol/acetonitrile

- Dung môi hữu cơ quá cao sẽ phá hủy kháng thể, làm hỏng cột.

* Khắc phục:

- Pha loãng đúng tỷ lệ hướng dẫn.

- Kiểm tra lại công thức chiết ban đầu.

❌ Lỗi 4: Nền mẫu quá bẩn

- Một số mẫu dầu, béo hoặc nhiều sắc tố có thể làm tắc gel.

* Giải pháp:

- Ly tâm kỹ hơn trước khi qua cột.

- Lọc lại bằng giấy lọc hoặc màng 0.45 µm.

❌ Lỗi 5: Đặt cột sai tư thế

- Cột IAC chỉ hoạt động đúng khi để thẳng đứng.

- Khắc phục: kiểm tra lại giá cột trước khi chạy mẫu.

❌ Lỗi 6: Nhiệt độ bảo quản cột không phù hợp

- Cột R-Biopharm cần bảo quản ở 2–8°C.

* Khắc phục:

- Không để cột ngoài môi trường quá lâu.

- Không đông đá cột.

4. Mẹo tăng độ thu hồi khi dùng cột ái lực miễn dịch R-Biopharm

- Đảm bảo tốc độ dòng chảy chậm, đều.

- Luôn pha loãng dịch chiết đúng chuẩn.

- Lắc trộn dung môi chiết đủ thời gian.

- Không dùng lại cột (cột IAC chỉ dùng 1 lần).

- Chuẩn hóa quy trình nội bộ để giảm sai lệch giữa người thao tác.

5. Mua cột ái lực miễn dịch R-Biopharm chính hãng tại Việt Nam

- Công ty Thái Bình Dương là đơn vị nhập khẩu chính hãng và phân phối đầy đủ các dòng cột ái lực miễn dịch của R-Biopharm tại Việt Nam, bao gồm:

- Aflatoxin (AFB1, AFB2, AFG1, AFG2)

- Ochratoxin A (OTA)

- Fumonisin (FUM B1/B2)

- Zearalenone (ZEN)

- Deoxynivalenol (DON)

- T-2 / HT-2

✔ Hàng luôn có sẵn

✔ Giá cạnh tranh

✔ Tư vấn kỹ thuật miễn phí

✔ Hỗ trợ xây dựng SOP và thẩm định phương pháp

Việc sử dụng đúng quy trình chuẩn khi chạy cột IAC R-Biopharm sẽ giúp phòng thí nghiệm đạt độ thu hồi tối ưu, giảm lỗi, tăng độ tin cậy và tiết kiệm chi phí.