Trong lĩnh vực sinh học phân tử, phản ứng RT-qPCR (Reverse Transcription Quantitative PCR) là công cụ không thể thiếu để phân tích biểu hiện gene, phát hiện virus RNA hoặc đánh giá mức độ biểu hiện gen trong các mẫu sinh học. Để đảm bảo độ chính xác, độ nhạy và độ tái lặp cao, việc sử dụng master mix one step chất lượng cao là yếu tố then chốt. Một trong những sản phẩm được các phòng thí nghiệm tin dùng hiện nay là One-Step Takyon® Ultra Probe 4X MasterMix của hãng Eurogentec.

1. Quy cách đóng gói

Thông tin PCR master mix One-Step Takyon® Ultra Probe 4X MasterMix có quy cách chuẩn như sau:

- Takyon® Ultra có sẵn trong các gói với kích thước khác nhau, từ 200 đến 10.000 - 20 µL cho phản ứng. 

- Đóng gói: dạng dung dịch đóng chai hoặc đóng sẵn ống 1,5 mL, tỷ lệ pha: 4X, đóng gói kèm với enzyme reverse transcriptase và RNase inhibitor (nếu lựa chọn bộ đầy đủ)

- Bảo quản ở -20°C

- Bộ dụng cụ 1000 phản ứng bao gồm: năm ống (mỗi ống 1 mL; nắp đen) của MasterMix 4X chứa Takyon® DNA polymerase, MgCl2, dNTP và chất ổn định; hai ống (0,22 ml mỗi ống; nắp trắng) Euroscript II RT PLUS; một ống (0,5 ml; nắp đỏ) của tham chiếu thụ động ROX™. Gói 5 gói bao gồm năm bộ dụng cụ 1000 phản ứng.

- Takyon® Ultra là thuốc thử RT-qPCR được tối ưu hóa với khả năng phát hiện RNA virus và đa mồi được cải tiến. Bộ One-Step Takyon® Ultra RT qPCR MasterMix dựa trên đầu dò của chúng tôi cho phép phát hiện RNA virus đặc hiệu, có khả năng tái tạo và độ nhạy cao như SARS-CoV-2, cúm và RSV, với dải động rộng. Kết hợp với Euroscript II Plus cải tiến, thuốc thử này cho phép thiết lập xét nghiệm tự động thông lượng cao một cách thuận tiện ở nhiệt độ phòng.

2. Ứng dụng

Sản phẩm master mix one step - One-Step Takyon® Ultra Probe 4X MasterMix được ứng dụng rộng rãi trong:

- Phát hiện và định lượng virus RNA (ví dụ: SARS-CoV-2, Influenza, Dengue...)

- Phân tích biểu hiện gen trong nghiên cứu sinh học phân tử

- Xét nghiệm y sinh học, thú y, nông nghiệp, thực phẩm

- Phân tích transcriptome và nghiên cứu các biến thể RNA

3. Nguyên lý hoạt động

Master mix one step là hỗn hợp phản ứng được thiết kế để thực hiện cả hai bước – phiên mã ngược (reverse transcription) và khuếch đại PCR – chỉ trong một ống phản ứng duy nhất. Quá trình hoạt động gồm:

- Phiên mã ngược: RNA mẫu được enzyme reverse transcriptase chuyển đổi thành cDNA.

- Khuếch đại: cDNA được khuếch đại theo thời gian thực bằng DNA polymerase, với sự hỗ trợ của đầu dò huỳnh quang (probe) như TaqMan®.

Cơ chế này giúp giảm thiểu nhiễm chéo và thời gian thao tác, đồng thời đảm bảo độ tin cậy cao trong phát hiện RNA.

4. Ưu điểm nổi bật

- Tỷ lệ 4X: cho phép thêm lượng mẫu RNA lớn hơn, giúp tăng độ nhạy cho các mẫu có nồng độ RNA thấp.

- One Step hoàn chỉnh: kết hợp cả enzyme phiên mã ngược và DNA polymerase trong một ống – tiết kiệm thời gian và giảm nguy cơ nhiễm chéo.

- Tối ưu cho đầu dò huỳnh quang: tương thích với nhiều loại probe như TaqMan®, Molecular Beacon.

- Hiệu suất cao và độ chính xác vượt trội: đảm bảo độ tái lập tốt giữa các lần chạy.

- Thân thiện với người dùng: dễ sử dụng, phù hợp với cả hệ thống máy qPCR thông thường và cao cấp.

- Ổn định và bảo quản lâu dài: có thể chịu được nhiều chu kỳ đông – rã đông, hỗ trợ lưu trữ và vận chuyển thuận tiện.

- MasterMix NHANH 4X: Hỗn hợp đậm đặc hơn để tối đa hóa thể tích khuôn mẫu của bạn, với khả năng cung cấp kết quả NHANH CHÓNG

- Cải thiện đa kênh: Chẩn đoán đồng thời nhiều tác nhân gây bệnh trong một lần thử nghiệm

- Dành cho tất cả các máy Thermocyclers: Bao gồm từng lọ ROX™ để có kết quả tối ưu trên tất cả các nền tảng dựa trên ROX

Bộ PCR Master Mix - One-Step Takyon® Ultra Probe 4X MasterMix là lựa chọn lý tưởng cho các ứng dụng RT-qPCR nhờ thiết kế thông minh, hiệu suất vượt trội và tính linh hoạt cao. Việc sử dụng master mix one step không chỉ giúp tăng độ nhạy và độ chính xác cho phản ứng mà còn tiết kiệm thời gian và công sức trong phòng thí nghiệm. Nếu bạn đang tìm kiếm một giải pháp toàn diện, ổn định và hiệu quả cho xét nghiệm RNA, thì sản phẩm của Eurogentec chắc chắn là một trong những lựa chọn hàng đầu.