1. Nguyên lý phương pháp enzymatic dùng để xác định ammonia
Phương pháp của R-Biopharm (ví dụ: test kit Enzymatic BioSystems Ammonia hoặc tương đương trong dòng Enzytec™ liquid Ammonia) dựa trên chuỗi phản ứng sau:
-Ammonia (NH₃) phản ứng với 2-oxoglutarate (α-ketoglutarate) và NADH (nicotinamide adenine dinucleotide, dạng khử) dưới xúc tác của enzyme glutamate dehydrogenase (GLDH):
- Lượng NADH bị tiêu thụ trong phản ứng này tỷ lệ thuận với lượng ammonia trong mẫu.
- Đo độ hấp thụ ánh sáng ở bước sóng 340 nm, nơi NADH hấp thụ mạnh. Sự giảm độ hấp thụ phản ánh lượng NADH bị oxy hóa và từ đó tính ra lượng ammonia.
2. Ưu điểm của phương pháp enzymatic R-Biopharm
- Độ chính xác cao, độ lặp lại tốt, độ nhạy cao.
- Không bị nhiễu bởi các hợp chất khác như trong phương pháp màu (colorimetric).
- Tiện lợi: quy trình chuẩn hóa, có thể dùng máy đo quang phổ chuẩn.
- Thích hợp nhiều loại mẫu như: thịt, cá, sữa, nước tiểu, nước uống, thực phẩm lên men, v.v.
3. Quy trình phân tích cơ bản (tùy test kit)
- Chuẩn bị mẫu: ly tâm hoặc lọc nếu cần thiết.
- Lấy lượng mẫu hoặc dịch chiết theo hướng dẫn (ví dụ: 20–100 µL).
- Thêm vào dung dịch phản ứng chứa GLDH, NADH và 2-oxoglutarate.
- Ủ phản ứng ở 25–37°C trong vài phút.
- Đo độ hấp thụ ở 340 nm trước và sau phản ứng.
- Tính toán nồng độ ammonia dựa vào hiệu chuẩn (calibration curve hoặc hệ số định lượng có sẵn).
4. Ứng dụng thực tiễn
- Đánh giá chất lượng thịt cá (chỉ số phân hủy protein).
- Kiểm soát quá trình lên men, đặc biệt trong sữa chua, bia, rượu.
- Kiểm tra dinh dưỡng trong thức ăn chăn nuôi.
- Phân tích nước tiểu, huyết thanh trong nghiên cứu sinh học hoặc y học, thú y.
Quý khách hàng có thể tham khảo chi tiết thông số bộ kit Ammonia do chúng tôi cung cấp tại đường dẫn sau:
